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1，融合率低，陽(yáng)性孔少①免疫的問(wèn)題。由于免疫原性不強(qiáng)或者免疫途徑不當(dāng)造成免疫弱，效價(jià)低。②融合過(guò)程中溫度、時(shí)間、PEG分子量，作用時(shí)間等。③脾細(xì)胞是否取出了足夠多的細(xì)胞，有無(wú)組織碎片干擾。④融合前骨髓瘤細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)是否完好，細(xì)胞是否渾圓，透亮，成對(duì)數(shù)生長(zhǎng)。2，單抗親和力整體低①免疫的問(wèn)題。免疫途徑不當(dāng)或者免疫原問(wèn)題。②融合細(xì)胞篩選過(guò)程出現(xiàn)遺漏，篩選方法不當(dāng)或檢測(cè)方法不當(dāng)，造成沒(méi)有篩到高親和力的融合細(xì)胞。③由于亞克隆細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境不合適，導(dǎo)致融合細(xì)胞染色體丟失，分泌特性改變，親和...

1，細(xì)胞長(zhǎng)的慢或細(xì)胞死亡正常生長(zhǎng)情況下，細(xì)胞一天傳代一次，生長(zhǎng)越好，貼壁越多對(duì)策：①培養(yǎng)基配方不對(duì)；②接種密度太低，低于10的4次方；③污染了支原體或者其他不明細(xì)菌，支原體的現(xiàn)狀是出現(xiàn)小黑點(diǎn)；細(xì)菌污染是渾濁；霉菌污染是出現(xiàn)白色肉眼可見(jiàn)菌落；不明細(xì)菌污染出現(xiàn)砂狀平鋪背景，視野發(fā)暗。④細(xì)胞瓶刷洗不干凈2，細(xì)胞形態(tài)異常正常生長(zhǎng)情況下，細(xì)胞渾圓，透亮，成對(duì)數(shù)生長(zhǎng)，生長(zhǎng)越好，貼壁多，懸浮少對(duì)策：①培養(yǎng)基配方不對(duì)；②接種密度太低，低于10的4次方；③污染了支原體或者其他不明細(xì)菌，支原體的...

一、單抗制備-骨髓瘤細(xì)胞SP2/0培養(yǎng)過(guò)程中遇到的問(wèn)題及對(duì)策1，細(xì)胞長(zhǎng)的慢或細(xì)胞死亡正常生長(zhǎng)情況下，細(xì)胞一天傳代一次，生長(zhǎng)越好，貼壁越多對(duì)策：①培養(yǎng)基配方不對(duì)；②接種密度太低，低于10的4次方；③污染了支原體或者其他不明細(xì)菌，支原體的現(xiàn)狀是出現(xiàn)小黑點(diǎn)；細(xì)菌污染是渾濁；霉菌污染是出現(xiàn)白色肉眼可見(jiàn)菌落；不明細(xì)菌污染出現(xiàn)砂狀平鋪背景，視野發(fā)暗。④細(xì)胞瓶刷洗不干凈2，細(xì)胞形態(tài)異常正常生長(zhǎng)情況下，細(xì)胞渾圓，透亮，成對(duì)數(shù)生長(zhǎng)，生長(zhǎng)越好，貼壁多，懸浮少對(duì)策：①培養(yǎng)基配方不對(duì)；②接種密度太低...

1，腹水少或者無(wú)腹水產(chǎn)生①致敏不正確，不正確的使用致敏劑，或者致敏時(shí)間與接種雜交瘤的時(shí)間相差太久，一般是7-14天，具體看小鼠的腹部情況。②雜交瘤細(xì)胞或者致敏劑的接種位置不正確，沒(méi)有打到腹腔，而是打到了皮下。③接種的雜交瘤細(xì)胞數(shù)量太少，太多或者細(xì)胞狀態(tài)不好。一般不50萬(wàn)個(gè)細(xì)胞左右為宜。④建議使用母鼠或者生育過(guò)的母鼠制備腹水。2，腹水沒(méi)有效價(jià)①制備腹水的雜交瘤極不穩(wěn)定，打到小鼠身上之前就失去抗體分泌能力或者打到腹腔內(nèi)就失去了分泌能力。②致敏小鼠時(shí)采用了錯(cuò)誤的致敏劑。③接種的雜交...

現(xiàn)象可能原因解決方法板條不顯色或者無(wú)相應(yīng)數(shù)值試劑使用順序混亂，或操作步驟出錯(cuò)嚴(yán)格遵循實(shí)驗(yàn)說(shuō)明重復(fù)實(shí)驗(yàn)使用了不同批次的試劑確保試劑來(lái)自同一試劑盒板條受潮嚴(yán)重板條要封好，干燥劑失效要及時(shí)更換低吸光度OD值試劑過(guò)期，或者不同的批次混用查證過(guò)期試劑和批次洗液配制錯(cuò)誤、洗滌浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)按照說(shuō)明書(shū)要求洗滌，并正確配制洗液孵育時(shí)間過(guò)短按照說(shuō)明書(shū)要求，嚴(yán)格計(jì)算好時(shí)間試劑污染確保吸取不同液體更換新的槍頭和盛放器皿試劑溫度過(guò)低根據(jù)試劑體積大小回溫時(shí)間相應(yīng)延長(zhǎng)，確保試劑*回溫使用錯(cuò)誤波長(zhǎng)讀數(shù)，或者...